Набор теста молока меламина быстрый ELISA для молока 96Wells/Kit ISO9001 обнаружения

Набор для тестирования меламина ELISA для обнаружения молока 96 Wells/Kit ISO9001

1. Принцип

Этот тестовый набор основан на непрямом конкурентном иммуноферментном анализе для обнаружения меламина в образце.Связующий антиген предварительно нанесен на стрипы микролунок.Меламин в образце и связывающие антигены, предварительно нанесенные на микролуночные полоски, конкурируют за антитела против меламина.После добавления ферментного конъюгата для окрашивания добавляют субстрат ТМБ.Значение оптической плотности (OD) тестируемого образца имеет отрицательную корреляцию с концентрацией меламина в образце.Это значение сравнивают со стандартной кривой и затем получают концентрацию меламина.

2.Набор для тестирования молокаСоставные части

3. Технические характеристики

Чувствительность: 0,5 частей на миллиард

Температура инкубатора: 25 ℃

Время инкубации: 30 мин ~ 15 мин

Предел обнаружения:

Масло, конфеты, сыр 10ppb

Скорость перекрестной реакции:

Меламин 100%

Скорость восстановления:

Сливочное масло 90±25%

Конфеты, сыр 95±25%

4. Необходимые, но не предоставленные материалы

1) Оборудование: микропланшет-ридер, принтер, вортекс, центрифуга, мерные пипетки, весы (обратная чувствительность 0,01 г), водяная баня 70℃;

2) Микропипетки: одноканальные 20~200 мкл, 100~1000 мкл;и многоканальные 30～300 мкл;

5. Предварительная обработка образцов

Инструкции (следующие пункты должны быть рассмотрены перед предварительной обработкой)

1) Для экспериментов можно использовать только одноразовые наконечники, и наконечники необходимо менять при использовании разных реагентов;

2) Перед экспериментом каждое экспериментальное оборудование должно быть чистым и при необходимости должно быть повторно очищено, чтобы избежать загрязнения, которое может повлиять на результаты эксперимента.

Подготовка раствора

1) Образец извлечения раствора

Разбавьте 10-кратный образец экстрагирующего раствора А деионизированной водой в соотношении 1:9;

2) Раствор экстракции образца B

Разбавьте 20-кратный экстрагирующий раствор B деионизированной водой в соотношении 1:19.

5.1 Масло

1) Возьмите 1 г свежего сливочного масла в центрифужную пробирку объемом 50 мл, добавьте 5 мл раствора А для выделения образцов, инкубируйте на водяной бане при 70℃ в течение 5 минут, встряхивайте и встряхивайте в течение 5 минут, центрифугируйте при скорости выше 4000 об/мин при комнатной температуре в течение 5 минут;

2) Возьмите 50 мкл жидкости нижнего слоя для анализа.

Кратность разбавления образца: 5

5.2 Конфеты, сыр

1) Возьмите 1 г свежего образца в центрифужную пробирку на 50 мл, добавьте 5 мл раствора В для экстракции образца, инкубируйте на водяной бане при 70℃ в течение 5 минут, встряхивайте и встряхивайте в течение 5 минут, центрифугируйте при скорости выше 4000 об/мин при комнатной температуре в течение 5 минут;

2) Возьмите 50 мкл жидкости нижнего слоя для анализа.

Кратность разбавления образца: 5

6. Процедуры ИФА

6.1 Инструкции

1 Доведите все реагенты и микролуночные полоски до комнатной температуры (20–25 ℃).

2 Верните все реагенты к температуре 2-8 ℃ сразу после использования.

3 Воспроизводимость анализа ELISA в значительной степени зависит от консистенции промывки планшета.Правильная операция промывки планшетов является ключевым моментом в процедурах ИФА.

4 Для инкубации при постоянной температуре все образцы и реагенты должны быть защищены от воздействия света, а каждый микропланшет должен быть закрыт защитной мембраной.

6.2 Порядок работы

1)Доведите тест-набор до комнатной температуры (20-25 ℃) не менее чем на 30 мин, обратите внимание, что перед использованием каждый реагент необходимо равномерно встряхнуть;поместите необходимые полоски микролунок в рамки планшета.Повторно запечатал неиспользованный микропланшет, хранящийся при 2-8 ℃, не замороженный.

2)Приготовление раствора: разбавьте 15 мл 20-кратного концентрированного промывочного буфера деионизированной водой до 300 мл для использования;

3)Нумерация: пронумеруйте микролунки в соответствии с образцами и стандартным раствором;каждый образец и стандартный раствор должны быть выполнены в двух повторностях;зафиксировать их положение.

4)Добавьте 50 мкл образца/стандартного раствора в отдельные дублированные лунки, затем добавьте 50 мкл ферментного конъюгата, затем добавьте 50 мкл рабочего раствора антител в каждую лунку, хорошо встряхните, закройте микропланшет покровной мембраной и инкубируйте при 25℃ в течение 30 мин;

5)Выливают жидкость из лунок, промывают микропланшет разбавленным промывочным буфером из расчета 250 мкл/лунку 5-6 раз.Каждый раз пропитывайте лунку разбавленным промывочным буфером на 15-30 секунд, а затем выкладывайте на впитывающую бумагу для просушки (если после взбивания остались пузырьки, срежьте их чистым кончиком).

6)Окрашивание: добавьте в каждую лунку по 50 мкл субстрата А, затем по 50 мкл субстрата В.Аккуратно перемешайте, встряхивая планшет вручную, и инкубируйте при 25 ℃ в течение 15 минут в темноте для окрашивания;

7)Определение: добавить в каждую лунку по 50 мкл стоп-раствора.Аккуратно перемешайте, встряхивая планшет вручную.Установите длину волны устройства для чтения микропланшетов на уровне 450 нм, чтобы определить значение оптической плотности каждой лунки.(Рекомендуется считать значение оптической плотности на двух длинах волн 450/630 нм в течение 5 минут).

7. Результат оценки

Есть два метода оценки результатов;первое - это грубое суждение, а второе - количественное определение.Обратите внимание, что значение OD образца имеет отрицательную корреляцию с содержанием меламина.

7.1 Качественное определение

Диапазон концентраций (нг/мл) может быть получен путем сравнения среднего значения ОП тестируемого образца со значением ОП стандартного раствора.Предполагая, что значение OD образца Ⅰ составляет 0,3, а значение OD образца Ⅱ равно 1,0, значение OD стандартных растворов составляет: 2,043 для 0 частей на миллиард, 1,604 для 0,5 частей на миллиард, 1,101 для 1,5 частей на миллиард, 0,512 для 4,5 частей на миллиард, 0,161 для 13,5 частей на миллиард. , 0,055 для 40,5 частей на миллиард, соответственно диапазон концентраций образца Ⅰ составляет от 4,5 до 13,5 частей на миллиард, а диапазон концентраций образца Ⅱ составляет от 1,5 до 4,5 частей на миллиард.

7.2 Количественное определение

Средние значения значений абсорбции эквивалентны проценту среднего значения ОП (В) испытуемого образца и стандартного раствора, деленному на значение ОП (В0) первого стандартного раствора (0 стандарт) и впоследствии умноженному на 100. %, то есть

B — среднее (двойные лунки) значение ОП тестируемого образца или стандартного раствора.

B0 — среднее значение ОП стандартного раствора с концентрацией 0 нг/мл.

Нарисуйте стандартную кривую с процентами поглощения стандартных растворов и полулогарифмическими значениями стандартных растворов меламина (нг/мл) по оси Y и X соответственно.Считайте соответствующую концентрацию испытуемого образца со стандартной кривой, включив процент его абсорбции в стандартную кривую.Полученное значение впоследствии умножается на соответствующую кратность разбавления, в конечном итоге получая концентрацию меламина в образце.

8. Меры предосторожности

1)Комнатная температура ниже 25 ℃ или температура реагентов и тестируемых образцов, которые не возвращаются к комнатной температуре (20-25 ℃), приведет к более низкому стандартному значению OD.

2)Высыхание микропланшета в процессе промывки будет сопровождаться ситуациями, включающими нелинейность стандартных кривых и нежелательную воспроизводимость;Поэтому переходите к следующему шагу сразу после стирки.

3)Равномерно перемешайте, иначе будет нежелательная воспроизводимость.

4)Стоп раствором является 2 М раствор серной кислоты, избегайте попадания на кожу.

5)Не используйте набор по истечении срока годности.Использование разбавленных или фальсифицированных реагентов из наборов приведет к изменению чувствительности и значений оптической плотности обнаружения.Не обменивайте реагенты из наборов с разными номерами партий.

6)Поместите неиспользованный микропланшет в самозапечатывающийся пакет, чтобы повторно запечатать его.Стандартное вещество и бесцветный формирователь цвета чувствительны к свету, и поэтому они не могут подвергаться прямому воздействию света.

7)Откажитесь от окрашивающего раствора с любым цветом, указывающим на вырождение этого раствора.Значение обнаружения стандартного раствора 1(0 ppb) менее 0,5 свидетельствует о его вырождении.

8)Оптимальная температура реакции составляет 25 ℃, а слишком высокие или низкие температуры приведут к изменениям в чувствительности обнаружения и значениях оптической плотности.

9. Хранение и срок годности

Хранение: хранить при температуре 2-8 ℃, не замораживать.

Срок годности: 12 месяцев;дата производства указана на коробке

Примечание. Если в вакуумной упаковке микропланшета имеется утечка, его можно использовать, это не влияет на результат теста, его использование не должно вызывать беспокойства.

Q1: Сколько времени вам потребуется для доставки?
A1: обычно отправляется в течение 7 рабочих дней.

Q2: Поддерживаете ли вы OEM/ODM?
A2: может поддерживаться.Мы можем настроить в соответствии с вашими конкретными потребностями и конкретными количествами.

Q3: Как ваша фабрика делает с точки зрения контроля качества?
A3: У нас есть сертификация ISO9001 и сертификация ISO13485, до сих пор весь производственный процесс, у нас есть стандартные правила, мы соблюдаем соответствующее поведение и законы правительства.

Q4: Гарантируется ли послепродажное обслуживание?
A4: Мы предоставляем профессиональное онлайн-техническое послепродажное обслуживание.Если продукт выйдет из строя во время эксперимента, мы можем предоставить
индивидуальное руководство по телефону, видео и другим формам.

Q5: Каков ваш минимальный объем заказа?
A5: 1 комплект.

Q6: какой способ доставки?
A6: он может быть отправлен экспресс-почтой (FEDEX, UPS, DHL, EMS и т. д.) или по воздуху и земле. Пожалуйста, подтвердите с нами, прежде чем размещать заказ.