
Add to Cart
Набор в реальном времени PCR энзима PCR для вируса Monkeypox с положительным и отрицательным контролем
Набор в реальном времени PCR для вируса Monkeypox основан на технологии в реальном времени PCR. Набор можно использовать для обнаруживать все образцы ДНК извлеченные от клинических образцов как носовые пробирки, oropharyngeal пробирка, слюна, моча, ткань убытока, эксудат, и кровь, etc.
Этот набор использован для in vitro качественного нуклеинового кисловочного обнаружения вируса Monkeypox в человеческих сыворотке, образцах эксудата убытока и образцах пробирки. Результаты теста этого набора для клинической ссылки только и не должны быть использованы как единственный стандарт для клинического диагноза.
Спецификация
Название продукта | Набор в реальном времени PCR вируса Monkeypox |
Каналы обнаружения | FAM |
IC | VIC |
Значение Ct | 35 |
Предел обнаружения | 200 Copies/mL |
Хранение | -20℃±5℃ |
Транспорт | Под замороженным условием |
Срок годности при хранении | 12 месяца |
Тип образца | Носовые пробирки, oropharyngeal пробирка, слюна, моча, ткань убытока, эксудат, и кровь, etc. |
Пакет | 24 теста/набор, 48 тестов/набор, 96 тестов/набор |
Компоненты | Буфер реакции PCR, смесь энзима PCR, надежное управление, отрицательный контроль |
Система в реальном времени PCR: Molarray MA-6000, ABI 7500, ViiATM 7, QuantStudio 5, QuantStudio 6/7 pro, QuantStudio 6/7 гибких трубопроводов, Agilent Mx3000P/3005P, ротор-GeneTM 6000/Q, Био-Rad CFX96 TouchTM/iQTM 5, Hongshi SLAN-96S/96P, AGS8830, AGS4800.
КОМПОНЕНТЫ
Спецификации | LQ-000301 24T | LQ-000302 48T | LQ-000303 96T |
Буфер реакции PCR | трубка 336μL×1 | трубка 672μL×1 | трубка 672μL×2 |
Смесь энзима PCR | трубка 30μL×1 | трубка 50μL×1 | трубка 100μL×1 |
Надежное управление | трубка 50μL×1 | трубка 100μL×1 | трубка 200μL×1 |
Отрицательный контроль | трубка 50μL×1 | трубка 100μL×1 | трубка 200μL×1 |
Инструкция для пользы (ПК) | 1 | 1 | 1 |
ИНДЕКС ЭКСПЛУАТАЦИОННЫХ ХАРАКТЕРИСТИК ПРОДУКТА
1. Чувствительность: 200 copies/mL.
2. Характерность: Отсутствие перекрестной реакции с вирусом энтеровируса (EV), кори (MV), вирусом краснухи (RV), вирусом Varicella-zoster (VZV), вирусом денге (DenV), человеческим вирусом Parvovirus B19 (HPVB19), Epstein-barr (EBv), человеческим вирусом герпеса 6 (HHV-6), etc.
3. Точность: ≤ 5% CV.
ПРОЦЕДУРЫ
1. Подготовки образца
Извлечение ДНК от клинических образцов проведено согласно соответствуя требованиям и процедурам в наборе извлечения ДНК вируса. Извлеченное
ДНК можно сразу использовать для обнаружения. Если образец не обнаружен немедленно после извлечения, то он следует сохранить на -70°C для положения боевой готовности, избегая повторенных циклов замораживани-таяния.
2. Подготовка системы реакции
(1) подготовка системы: Примите вне реагент от набора, и позвольте ему растаять совершенно на комнатной температуре. Переверните смесь и центрифугу немедленно. Реакции теста n (n = количество образцов, который нужно испытать + надежное управление + отрицательный контроль + 1) подготовлены для систем реакции, соответственно, следующим образом.
Компоненты | Том для 1 системы реакции | Том для системы реакции n |
Буфер реакции PCR | 14μL | 14μLx n |
Смесь энзима PCR | 1μL | 1μLx n |
Полный том | 15μL | 15μLx n |
(2) распределение системы реакции: Смешайте хорошо вышеуказанный буфер реакции, центрифугу, и распределите 15μL аликвотов в трубки PCR соответствующие для дневной аппаратуры PCR. (Центрифугуйте трубки PCR на 6,000rpm для 30s и перехода для того чтобы попробовать зону обработки.)
3. Загрузка образца (зона обработки образца)
Добавьте нуклеиновый кисловочный образец 10μL, отрицательный контроль и надежное управление к вышеуказанным трубкам PCR соответственно. Покройте трубки плотно и центрифугу на 6,000rpm для 10s и после этого переход к зоне амплификации PCR.
* мера предосторожности: Добавление образцов в следующем заказе
порекомендовал: образец отрицательного control-> нуклеиновый кисловочный - > надежное управление.
4. Амплификация PCR (зона амплификации PCR)
4,1 положите caped трубки PCR в машину в реальном времени PCR для амплификации.
4,2 установка условия цикла PCR флуоресцирования
Программа | Температура | Продолжительность реакции | Количество циклов |
1 | 50°C | минута 2 | 1 |
2 | 95°C | 2s | 1 |
3 | 95°C | 1s | 41 |
60°C | 13s/20s/35s |
Соберите дневные сигналы на ℃ 3:60 шага; 35s на ABI 7500, 20s для SLAN-96S/96P, пока 13s для других систем в реальном времени PCR. Полный том: 25μL.
4,3 избавление после обнаружения
Размещайте трубки PCR в загерметизированной сумке после реакции и обработайте используемые трубки как медицинские отходы.
5. Установки для анализа результата
Установите базис на регион перед степенной амплификацией где дневные сигналы всех образцов относительно стабилизированы (отсутствие значительных зыбкост во всех образцах); установите отправную точку (номер цикла) далеко от зыбкост сигнала на начало
участок собрания флуоресцирования; установите конечный момент (номер цикла) 1~3 цикла перед Ct первого образца для того чтобы вписать степенную амплификацию. 4~15 циклов порекомендованы.
Установите право порога над высшей точкой отрицательной кривой усиления контроля (незаконной кривой шума).
6. Критеря по проверки качества
До оценивать результаты образца, надежное управление и отрицательный контроль должны быть интерпретированы используя таблицу толкования ниже, и надежное управление и отрицательную кривую контроля необходимо выполнить правильно, в противном случае результат образца инвалидн.
Каналы Контроли | Значение порога цикла (Ct) | |
FAM | VIC | |
Надежное управление | Ct > 40 или UNDET | Ct > 40 или UNDET |
Отрицательный контроль | ≤ 35 Ct | ≤ 35 Ct |
7. Толкование результатов теста
Каналы для вируса Monkeypox, результат FAM обнаружения должны быть интерпретированы как ниже.
a) Позитв: ≤ 38 Ct и кривая усиления S-образный.
b) Заподозренный: 38 < Ct=""> 40 или нулевого ≤ 35 Ct и Ct в канале VIC для второго теста.
c) Недостаток: Ct > 40 или нулевое ≤ 35 Ct и Ct в канале VIC.
d) Испытайте повторно: Ct > 40 или нулевой Ct и Ct > 35 в канале VIC.