Набор сэндвича ЭЛИСА инкрети глупого тиреоида высокой точности возбуждающий с 2 часами времени Ассай

Набор сэндвича ЭЛИСА инкрети глупого тиреоида высокой точности возбуждающий с 2 часами времени Ассай
 

Кат.Но Э0217Бо

Размер: 96 колодцев

Предполагаемое использование

Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения инкрети глупого тиреоида возбуждающей (также известной как ТСХ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.

Чувствительность: 0.027мИУ/Л

Стандартный ряд кривой: 0.05мИУ/Л - 30мИУ/Л

Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.

продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.

Предполагаемое использование

Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения инкрети глупого тиреоида возбуждающей (также известной как ТСХ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.

Принцип Ассай

Этот набор сэндвича ЭЛИСА Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с глупым антителом ТСХ. ТСХ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед глупое антитело ТСХ добавлено и связывает к ТСХ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ТСХ. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству глупого ТСХ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.

Собрание образца

Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.

Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.

Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.

Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.

Ткань другие содержащие в теле жидкости полощет ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.

Заметьте

• Концентрация образца должна быть предсказана перед быть использованным в ассай. Если концентрация образца нет внутри ряд стандартной кривой, то потребители должны связаться мы для того чтобы определить оптимальный образец для их определенных экспериментов.
• Образцы, который нужно использовать в течение 5 дней следует сохранить на образцах 2-8°К. должны быть аликвотед или должны храниться на -20°К не позднее 1 месяц или -80°К не позднее 6 месяцев. Авоид повторило циклы таяния замораживания.
• Образцы должны быть принесены к комнатной температуре перед началом ассай.
• Центрифуга для того чтобы собрать образец перед использованием.
• Образцы содержа НаН3 нельзя испытать по мере того как оно блокирует работу пероксидазы (HRP) редиски лошади.
• Соберите супернатанц осторожно. Когда седименты произошли во время хранения, центрифугирование должно быть выполнено снова.
• Хемолысис может значительно плотно сжать ценность результатов теста. Позаботьтесь для того чтобы уменьшить хэмолысис.

*Сампле нельзя разбавить с этим набором. Вследствие материала мы используем для подготовки набора, взаимодействие матрицы образца может ложно отжать характерность и точность ассай.

Подготовка реагента

Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.

Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (32мИУ/Л) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 16мИУ/Л. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (16мИУ/Л) с стандартным разжижителем для произведения решений 8мИУ/Л, 4мИУ/Л, 2мИУ/Л и 1мИУ/Л. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 мИУ/Л). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:

Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 600 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.

Процедура по Ассай

1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.

2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.

3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.

4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте анти--ТСХ антитело 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.

5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.

6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.

7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.

8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.

Вычисление результата

Построьте стандартную кривую путем прокладка курса среднего ОД для каждого стандартного на вертикальной оси (ы) против концентрации на горизонтальной (кс) оси и нарисуйте наиболее пригодную кривую через пункты на диаграмме. Эти вычисления можно наиболее хорошо выполнить с машинным программным обеспечением подбора кривой и наиболее пригодная линия может быть определена регрессионным анализом.