
Add to Cart
Набор теста Иммуноассайс чувствительности и характерности БФГФ крысы сильный подгонянный с 2 часами времени Ассай
Ра Кат.Но е0341
Стандартный ряд кривой: 2нг/Л - 600нг/Л
Чувствительность: 1.16нг/Л
продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Обеспеченный реагент
Компоненты | Количество |
Стандартное решение (640нг/Л) | 0.5мл кс1 |
Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
Остановите решение | 6мл кс1 |
Решение а субстрата | 6мл кс1 |
Решение б субстрата | 6мл кс1 |
Концентрат буфера мытья (25кс) | 20мл кс1 |
Антитело крысы БФГФ Биотинылатед | 1мл кс1 |
Инструкция потребителя | 1 |
Уплотнитель плиты | пикс 2 |
Сумка молнии | 1 пик |
Не поставляемый материал требуемый но
Предполагаемое использование
Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения фактора роста фиброцита крысы основного (также известного как БФГФ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
Принцип Ассай
Этот набор сэндвича Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с антителом крысы БФГФ. БФГФ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед антитело крысы БФГФ добавлено и связывает к БФГФ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед БФГФ. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству крысы БФГФ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Меры предосторожности
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (640нг/Л) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 320нг/Л. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (320нг/Л) с стандартным разжижителем для произведения решений 160нг/Л, 80нг/Л, 40нг/Л и 20нг/Л. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/Л). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
320нг/Л | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
160нг/Л | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
80нг/Л | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
40нг/Л | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
20нг/Л | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
640нг/Л | 320нг/Л | 160нг/Л | 80нг/Л | 40нг/Л | 20нг/Л |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 25кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте анти--БФГФ антитело 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.