CO. Шанхая Korain Biotech, Ltd
Shanghai Korain Biotech Co Ltd
Add to Cart
Набор Велльс ФТА ЭЛИСА крысы 96 высокой точности и характерности для точного количественного обнаружения
Кат.Но е1070Ра
Стандартный ряд кривой: 0.05ммол/Л - 10ммол/Л
Чувствительность: 0.021ммол/Л
Принцип Ассай
Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с антителом ФТА крысы. ФТА представляет в образце добавлен и связывает к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед антитело ФТА крысы добавлено и связывает к ФТА в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ФТА. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству крысы ФТА. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Обеспеченный реагент
| Компоненты | Количество |
| Стандартное решение (14.4ммол/Л) | 0.5мл кс1 |
| Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
| Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
| Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
| Остановите решение | 6мл кс1 |
| Решение а субстрата | 6мл кс1 |
| Решение б субстрата | 6мл кс1 |
| Концентрат буфера мытья (30кс) | 20мл кс1 |
| Антитело ФТА крысы Биотинылатед | 1мл кс1 |
| Инструкция потребителя | 1 |
| Уплотнитель плиты | пикс 2 |
| Сумка молнии | 1 пик |
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (14.4ммол/Л) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 7.2ммол/Л. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (7.2ммол/Л) с стандартным разжижителем для произведения решений 3.6ммол/Л, 1.8ммол/Л, 0.9ммол/Л и 0.45ммол/Л. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 ммол/Л). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
| 7.2ммол/Л | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
| 3.6ммол/Л | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
| 1.8ммол/Л | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
| 0.8ммол/Л | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
| 0.4ммол/Л | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
| Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
| 14.4ммол/Л | 7.2ммол/Л | 3.6ммол/Л | 1.8ммол/Л | 0.9ммол/Л | 0.45ммол/Л |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте антитело 10μл анти--ФТА к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.
Вычисление результата
Построьте стандартную кривую путем прокладка курса среднего ОД для каждого стандартного на вертикальной оси (ы) против концентрации на горизонтальной (кс) оси и нарисуйте наиболее пригодную кривую через пункты на диаграмме. Эти вычисления можно наиболее хорошо выполнить с машинным программным обеспечением подбора кривой и наиболее пригодная линия может быть определена регрессионным анализом.