Крыса ГХРЛ/набор Гхрелин ЭЛИСА, высокий набор Ассай сэндвича характерности ЭЛИСА

характерность и чувствительность набора Гхрелин ГХРЛ ЭЛИСА крысы 96велльс

Кат.Но Э0896Ра

Стандартный ряд кривой: 40нг/Л - 12000нг/Л

Чувствительность: 20.56нг/Л

Размер: 96 колодцев

Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.

* этот продукт для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.

Точность

Точность Интра-Ассай (точность в пределах ассай) 3 образца известной концентрации была испытани по одна плита для того чтобы определить точность интра-ассай.

Точность Интер-Ассай (точность между ассайс) 3 образца известной концентрации была испытана в отдельных ассайс для того чтобы определить точность интер-ассай.

КВ (%) = СД/меан кс 100

Интра-Ассай: КВ<8>

Интер-Ассай: КВ<10>

Предполагаемое использование

Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения крысы Гхрелин (также известного как ГХРЛ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.

Принцип Ассай

Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с антителом крысы ГХРЛ. ГХРЛ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед антитело крысы ГХРЛ добавлено и связывает к ГХРЛ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ГХРЛ. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству крысы ГХРЛ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.

Собрание образца

Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.

Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.

Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.

Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.

Ткани Ринсе ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.

Подготовка реагента

Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.

Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (12800нг/Л) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 6400нг/Л. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (6400нг/Л) с стандартным разжижителем для произведения решений 3200нг/Л, 1600нг/Л, 800нг/Л и 400нг/Л. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/Л). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:

Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.

Сводка

1. Подготовьте все реагенты, образцы и стандарты.
2. Добавьте образец и реагент ЭЛИСА в каждое хорошо. Инкубируйте на 1 час на 37°К.

3. Помойте плиту 5 раз.

4. Добавьте решение а и Б. Инкубировать субстрата на 10 минут на 37°К.

5. Добавьте остановите решение и цвет превращается.

6. Прочитайте значение ОД не позднее 10 минут.

Ссылки

В. Вэй, Г. Ванг, Ци кс., англичанин Э.В., Грелей Г.Х. Младший
Эндокринология 146:1611- 1625(2005)