Прослоите тип человеческий тситохром П450 1А2 набора ЭЛИСА с сильной чувствительностью

Тип человеческий набор сэндвича теста тситохрома П450 1А2 ЭЛИСА с сильными чувствительностью и характерностью

Кат.Но е2281Ху

Размер: 96 колодцев

Стандартный ряд кривой: 10нг/Л - 2000нг/Л

Чувствительность: 5.15нг/Л

продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.

Собрание образца

Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.

Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.

Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.

Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.

Ткань и другие содержащие в теле жидкости полощут ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.

Заметьте

• Концентрация образца должна быть предсказана перед быть использованным в ассай. Если концентрация образца нет внутри ряд стандартной кривой, то потребители должны связаться мы для того чтобы определить оптимальный образец для их определенных экспериментов.
• Образцы, который нужно использовать в течение 5 дней следует сохранить на образцах 2-8°К. должны быть аликвотед или должны храниться на -20°К не позднее 1 месяц или -80°К не позднее 6 месяцев. Авоид повторило циклы таяния замораживания.
• Образцы должны быть принесены к комнатной температуре перед началом ассай.
• Центрифуга для того чтобы собрать образец перед использованием.
• Образцы содержа НаН3 нельзя испытать по мере того как оно блокирует работу пероксидазы (HRP) редиски лошади.
• Соберите супернатанц осторожно. Когда седименты произошли во время хранения, центрифугирование должно быть выполнено снова.
• Хемолысис может значительно плотно сжать ценность результатов теста. Позаботьтесь для того чтобы уменьшить хэмолысис.

*Сампле нельзя разбавить с этим набором. Вследствие материала мы используем для подготовки набора, взаимодействие матрицы образца может ложно отжать характерность и точность ассай.

Принцип Ассай

Этот набор елиса сэндвича Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с человеческим антителом КИП1А2. КИП1А2 представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед человеческое антитело КИП1А2 добавлено и связывает к КИП1А2 в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед КИП1А2. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству человеческого КИП1А2. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.

Предполагаемое использование

Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения человеческого тситохрома П450 1А2 (также известного как КИП1А2) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.

Обеспеченный реагент

Меры предосторожности

• До пользы, набор и образец елиса сэндвича следует греть естественно к комнатной температуре 30 минут.
• Этой инструкцией необходимо строго следовать в эксперименте.
• Раз пожеланное число прокладок извлекалось, немедленно заново герметизирует сумку для защиты оставать от ухудшения качества. Покройте все реагенты когда не в пользе.
• Маке суре капая заказ и тариф из пипетки добавления от хорошо к хорошо капая реагенты из пипетки.
• Пипетка наклоняет и уплотнитель плиты в руке должен быть чист и устраним избежать взаимн загрязнения.
• Избегите использовать реагенты от различных серий совместно.
• Решение б субстрата чувствительно к свету, не подвергает решение действию б субстрата для того чтобы осветить в течение длительного времени.
• Остановите решение содержит кислоту. Пожалуйста несите предохранение от глаза, руки и кожи при использовании этого материала. Избегите контакта кожи или слизистых мембран с реагентом набора.
• Набор елиса сэндвича не должен быть использован за сроком годности.

Процедура по Ассай

1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.

2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.

3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.

4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте антитело 10μл анти-КИП1А2 к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.

5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.

6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.

7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.

8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.