
Add to Cart
Подгонянный размер Велльс набора 96 Ассай глобулина ЭЛИСА человеческого секса лабораторных исследований Инкрет-связывая
Кат.Но еХу1011
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте анти--СХБГ антитело 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.
Ассай принцип
Этот набор Ассай ЭЛИСА Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с человеческим антителом СХБГ. СХБГ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед человеческое антитело СХБГ добавлено и связывает к СХБГ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к Биотинылатед СХБГантибоды. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству человеческого СХБГ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Предполагаемое использование
Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения глобулина человеческого секса Инкрет-связывая (также известного как СХБГ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
Обеспеченный реагент
Компоненты | Количество |
Стандартное решение (240нмол/Л) | 0.5мл кс1 |
Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
Остановите решение | 6мл кс1 |
Решение а субстрата | 6мл кс1 |
Решение б субстрата | 6мл кс1 |
Концентрат буфера мытья (25кс) | 20мл кс1 |
Антитело Биотинылатед человеческое СХБГ | 1мл кс1 |
Инструкция потребителя | 1 |
Уплотнитель плиты | пикс 2 |
Сумка молнии | 1 пик |
Собрание образца
Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.
Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.
Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.
Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Ткань другие содержащие в теле жидкости полощет ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Заметьте
*Сампле нельзя разбавить с этим набором. Вследствие материала мы используем для подготовки набора, взаимодействие матрицы образца может ложно отжать характерность и точность ассай.
Стандартный ряд кривой: 0.5нмол/Л - 200нмол/Л
Чувствительность: 0.28нмол/Л
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Реферансес
«Концентрация сыворотки глобулина инкрети секса биндинг повышена в квашиоркор и нервные анорексии но не в марасмус.»
Н. Паскаля, Амоузоу Э.К., А. Санни, Ф. Намоур, Абдельмоутталеб и., Видайльхет М., Гуэант ДЖ.Л.
До полудня. Дж. Клин. Нутр. 76:239- 244(2002)