
Add to Cart
Собачий набор центрика пептида ЭЛИСА высокой точности сосудоактивный кишечный с 2 часами времени Ассай
Кат.Но е0290Ка
Принцип Ассай
Этот набор теста елиса Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с собачьим антителом ВИП. ВИП представляет в образце добавлен и связывает к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед собачье антитело ВИП добавлено и связывает к ВИП в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ВИП. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству собачьего ВИП. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Предполагаемое использование
Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения собачьего сосудоактивного кишечного пептида (также известного как ВИП) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Меры предосторожности
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (800нг/Л) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 400нг/Л. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (400нг/Л) с стандартным разжижителем для произведения решений 200нг/Л, 100нг/Л, 50нг/Л и 25нг/Л. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/Л). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
400нг/Л | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
200нг/Л | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
100нг/Л | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
50нг/Л | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
25нг/Л | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
800нг/Л | 400нг/Л | 200нг/Л | 100нг/Л | 50нг/Л | 25нг/Л |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 25кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Собрание образца
Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.
Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.
Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.
Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Ткань другие содержащие в теле жидкости полощет ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Заметьте
*Сампле нельзя разбавить с этим набором. Вследствие материала мы используем для подготовки набора, взаимодействие матрицы образца может ложно отжать характерность и точность ассай.
Сводка
1. Подготовьте все реагенты, образцы и стандарты.
2. Добавьте образец и реагент ЭЛИСА в каждое хорошо. Инкубируйте на 1 час на 37°К.
3. Помойте плиту 5 раз.
4. Добавьте решение а и Б. Инкубировать субстрата на 10 минут на 37°К.
5. Добавьте остановите решение и цвет превращается.
6. Прочитайте значение ОД не позднее 10 минут.