
Add to Cart
Набор теста Иммуноассай Интерлеукин 10 лабораторных исследований собачий высокий чувствительный 2 часа длины Ассай
Кат.Но е0006Ка
Принцип Ассай
Этот набор теста елиса Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с собачьим антителом ИЛ-10. ИЛ-10 представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед собачье антитело ИЛ-10 добавлено и связывает к ИЛ-10 в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ИЛ-10. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству собачьего ИЛ-10. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Предполагаемое использование
Этот набор теста елиса для точного количественного обнаружения собачьего Интерлеукин 10 (также известного как ИЛ-10) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Обеспеченный реагент
Компоненты | Количество |
Стандартное решение (800пг/мл) | 0.5мл кс1 |
Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
Остановите решение | 6мл кс1 |
Решение а субстрата | 6мл кс1 |
Решение б субстрата | 6мл кс1 |
Концентрат буфера мытья (30кс) | 20мл кс1 |
Антитело ИЛ-10 Биотинылатед собачье | 1мл кс1 |
Инструкция потребителя | 1 |
Уплотнитель плиты | пикс 2 |
Сумка молнии | 1 пик |
Собрание образца
Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.
Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.
Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.
Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Ткань другие содержащие в теле жидкости полощет ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
*Сампле нельзя разбавить с этим набором. Вследствие материала мы используем для подготовки набора, взаимодействие матрицы образца может ложно отжать характерность и точность ассай.
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (800пг/мл) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 400пг/мл. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (400пг/мл) с стандартным разжижителем для произведения решений 200пг/мл, 100пг/мл, 50пг/мл и 25пг/мл. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 пг/мл). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
400пг/мл | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
200пг/мл | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
100пг/мл | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
50пг/мл | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
25пг/мл | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
800пг/мл | 400пг/мл | 200пг/мл | 100пг/мл | 50пг/мл | 25пг/мл |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 600 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Сводка
1. Подготовьте все реагенты, образцы и стандарты.
2. Добавьте образец и реагент ЭЛИСА в каждое хорошо. Инкубируйте на 1 час на 37°К.
3. Помойте плиту 5 раз.
4. Добавьте решение а и Б. Инкубировать субстрата на 10 минут на 37°К.
5. Добавьте остановите решение и цвет превращается.
6. Прочитайте значение ОД не позднее 10 минут.