
Add to Cart
Тип набор теста протеина ЭЛИСА человеческого Эосинофил высокой точности сэндвича и характерности катионоактивный
Кат.Но е1391Ху
Принцип Ассай
Этот набор Ассай ЭЛИСА Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с человеческим антителом ЭКП. ЭКП представляет в образце добавлен и связывает к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед человеческое антитело ЭКП добавлено и связывает к ЭКП в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу ЭКП Биотинылатед. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству человеческого ЭКП. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Точность
Точность Интра-Ассай (точность в пределах ассай) 3 образца известной концентрации была испытани по одна плита для того чтобы определить точность интра-ассай.
Точность Интер-Ассай (точность между ассайс) 3 образца известной концентрации была испытана в отдельных ассайс для того чтобы определить точность интер-ассай.
КВ (%) = СД/меан кс 100
Интра-Ассай: КВ<8>
Интер-Ассай: КВ<10>
Меры предосторожности
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (120нг/мл) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 60нг/мл. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (60нг/мл) с стандартным разжижителем для произведения решений 30нг/мл, 15нг/мл, 7.5нг/мл и 3.75нг/мл. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/мл). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
60нг/мл | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
30нг/мл | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
15нг/мл | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
7.5нг/мл | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
3.75нг/мл | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
120нг/мл | 60нг/мл | 30нг/мл | 15нг/мл | 7.5нг/мл | 3.75нг/мл |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 25кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте антитело анти--ЭКП 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.