Подгонянный протеин Маннма набора крысы ЭЛИСА Биндинг с 2 часами времени Ассай

Подгонянный маннана протеина Маннма крысы набор Лектин МБП МБЛ ЭЛИСА Биндинг Биндинг

Ра Кат.Но е0629

Стандартный ряд кривой: 0.5нг/мл - 100нг/мл

Чувствительность: 0.25нг/мл

Размер: 96 колодцев

Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.

продукт *Тхис для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.

Принцип Ассай

Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с антителом крысы МБП/МБЛ. МБП/МБЛ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед антитело крысы МБП/МБЛ добавлено и связывает к МБП/МБЛ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед МБП/МБЛ. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству крысы МБП/МБЛ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.

Предполагаемое использование

Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения протеина Маннма крысы Биндинг, Лектин маннана Биндинг (также известного как МБП/МБЛ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.

Меры предосторожности

• До пользы, набор и образец следует греть естественно к комнатной температуре 30 минут.
• Этой инструкцией необходимо строго следовать в эксперименте.
• Раз пожеланное число прокладок извлекалось, немедленно заново герметизирует сумку для защиты оставать от ухудшения качества. Покройте все реагенты когда не в пользе.
• Маке суре капая заказ и тариф из пипетки добавления от хорошо к хорошо капая реагенты из пипетки.
• Пипетка наклоняет и уплотнитель плиты в руке должен быть чист и устраним избежать взаимн загрязнения.
• Избегите использовать реагенты от различных серий совместно.
• Решение б субстрата чувствительно к свету, не подвергает решение действию б субстрата для того чтобы осветить в течение длительного времени.
• Остановите решение содержит кислоту. Пожалуйста несите предохранение от глаза, руки и кожи при использовании этого материала. Избегите контакта кожи или слизистых мембран с реагентом набора.
• Набор не должен быть использован за сроком годности.

Обеспеченный реагент

Подготовка реагента

Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.

Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (128нг/мл) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 64нг/мл. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (64нг/мл) с стандартным разжижителем для произведения решений 32нг/мл, 16нг/мл, 8нг/мл и 4нг/мл. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/мл). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:

Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.

Процедура по Ассай

1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.

2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.

3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.

4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте антитело 10μл анти-МБП/МБЛ к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.

5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.

6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.

7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.

8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.

Сводка

1. Подготовьте все реагенты, образцы и стандарты.

2. Добавьте образец и реагент ЭЛИСА в каждое хорошо. Инкубируйте на 1 час на 37°К.

3. Помойте плиту 5 раз.

4. Добавьте решение а и Б. Инкубировать субстрата на 10 минут на 37°К.

5. Добавьте остановите решение и цвет превращается.

6. Прочитайте значение ОД не позднее 10 минут.

Реферансес

«Этап-специфическое выражение протеина миелина основного в олигодендроцитах включает репрессию Нккс2.2-медятед которая сброшена фактором транскрипции Сп1.»
К. Вэй, Мискиминс В.К., Р. Мискиминс.
Дж. Биол. Чем. 280:16284- 16294(2005)