CO. Шанхая Korain Biotech, Ltd
Shanghai Korain Biotech Co Ltd
Add to Cart
Глупое Фетуйн набор ЭЛИСА с высоким Спесифиситы и чувствительностью
Кат.Но е2018Бо
Стандартный ряд кривой: 5мг/Л - 1800мг/Л
Чувствительность: 2.54мг/Л
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
* этот продукт для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Предполагаемое использование
Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения глупого Фетуйн а (также известного как ФЭТУ-А) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
Принцип Ассай
Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с глупым антителом ФЭТУ-А. ФЭТУ-А представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед глупое антитело ФЭТУ-А добавлено и связывает к ФЭТУ-А в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ФЭТУ-А. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству глупого ФЭТУ-А. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Обеспеченный реагент
| Компоненты | Количество |
|
Стандартное решение (1920мг/Л) |
0.5мл кс1 |
| Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
| Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
| Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
| Остановите решение | 6мл кс1 |
| Решение а субстрата | 6мл кс1 |
| Решение б субстрата | 6мл кс1 |
| Концентрат буфера мытья (30кс) | 20мл кс1 |
| Антитело Биотинылатед глупое ФЭТУ-А | 1мл кс1 |
| Инструкция потребителя | 1 |
| Уплотнитель плиты | пикс 2 |
| Сумка молнии | 1 пик |
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (1920мг/Л) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 960мг/Л. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (960мг/Л) с стандартным разжижителем для произведения решений 480мг/Л, 240мг/Л, 120мг/Л и 60мг/Л. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 мг/Л). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20℃ и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
| 960мг/Л | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
| 480мг/Л | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
| 240мг/Л | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
| 120мг/Л | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
| 60мг/Л | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
| Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
| 1920мг/Л | 960мг/Л | 480мг/Л | 240мг/Л | 120мг/Л | 60мг/Л |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте анти--ФЭТУ- антитело 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.
Ссылки
[1] «обогащение сродства и характеризация мусин коре-1 печатают гликопептиды от глупой сыворотки. «Дарула З., Медзихрадсзкы К.Ф.Мол. Клетка. Протеомикс 8:2515- 2526(2009)