CO. Шанхая Korain Biotech, Ltd
Shanghai Korain Biotech Co Ltd
Add to Cart
Собачий набор Остеокалькин ЭЛИСА с высоким Спесифиситы и чувствительностью
Кат.Но Э0146Ка
Принцип Ассай
Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с собачьим антителом ОТ. ОТ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед собачье антитело ОТ добавлено и связывает к ОТ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ОТ. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству собачьего ОТ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Обеспеченный реагент
| Компоненты | Количество |
|
Стандартное решение (24нг/мл) |
0.5мл кс1 |
| Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
| Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
| Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
| Остановите решение | 6мл кс1 |
| Решение а субстрата | 6мл кс1 |
| Решение б субстрата | 6мл кс1 |
| Концентрат буфера мытья (30кс) | 20мл кс1 |
| Антитело Биотинылатед собачье ОТ | 1мл кс1 |
| Инструкция потребителя | 1 |
| Уплотнитель плиты | пикс 2 |
| Сумка молнии | 1 пик |
Собрание образца
Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.
Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.
Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.
Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Ткани Ринсе ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (24нг/мл) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 12нг/мл. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (12нг/мл) с стандартным разжижителем для произведения решений 6нг/мл, 3нг/мл, 1.5нг/мл и 0.75нг/мл. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/мл). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20℃ и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
| 12нг/мл | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
| 6нг/мл | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
| 3нг/мл | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
| 1.5нг/мл | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
| 0.75нг/мл | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
| Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
| 24нг/мл | 12нг/мл | 6нг/мл | 3нг/мл | 1.5нг/мл | 0.75нг/мл |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Ссылки
[1" на высшем уровне выражение в Эшеричя Коли биологически активного глупого гормона роста. «Джордж Х.ДЖ., Л'Италиен ДЖ.ДЖ., Пиласински В.П., Глассман Д.Л., Крзызек Р.А.ДНА 4:273- 281(1985)