CO. Шанхая Korain Biotech, Ltd
Shanghai Korain Biotech Co Ltd
Add to Cart
Собачий набор прогестерона ЭЛИСА с высоким Спесифиситы и чувствительностью
Кат.Но Э0057Ка
Стандартный ряд кривой: 1нг/мл - 100нг/мл
Чувствительность: 0.51нг/мл
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
* этот продукт для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Предполагаемое использование
Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения собачьего прогестерона (также известного как ПРОГ) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
Принцип Ассай
Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с собачьим антителом ПРОГ. ПРОГ представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед собачье антитело ПРОГ добавлено и связывает к ПРОГ в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ПРОГ. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству собачьего ПРОГ. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (128нг/мл) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 64нг/мл. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (64нг/мл) с стандартным разжижителем для произведения решений 32нг/мл, 16нг/мл, 8нг/мл и 4нг/мл. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/мл). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20℃ и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
| 64нг/мл | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
| 32нг/мл | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
| 16нг/мл | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
| 8нг/мл | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
| 4нг/мл | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
| Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
| 128нг/мл | 64нг/мл | 32нг/мл | 16нг/мл | 8нг/мл | 4нг/мл |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте анти--ПРОГ антитело 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.
Ссылки
[1] «высокопоставленное выражение в Эшеричя Коли биологически активного глупого гормона роста. «Джордж Х.ДЖ., Л'Италиен ДЖ.ДЖ., Пиласински В.П., Глассман Д.Л., Крзызек Р.А.ДНА 4:273- 281(1985)