CO. Шанхая Korain Biotech, Ltd
Shanghai Korain Biotech Co Ltd
Add to Cart
96 набор Сенситивие ДЭФБ4 ЭЛИСА мыши колодцев высокий
Кат.Но Э1204Мо
Стандартный ряд кривой: 0.05нг/мл - 10нг/мл
Чувствительность: 0.021нг/мл
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
* этот продукт для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Предполагаемое использование
Этот набор сэндвича для точного количественного обнаружения мыши бета-дефенсин 4 (также как ДЭФБ4) в сыворотке, плазме, супернатес культуры клетки, лысатес клетки, гомогенатах ткани.
Принцип Ассай
Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с антителом мыши ДЭФБ4. ДЭФБ4 представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед антитело мыши ДЭФБ4 добавлено и связывает к ДЭФБ4 в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед ДЭФБ4. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству мыши ДЭФБ4. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Собрание образца
Сыворотка позволяет сыворотке свернуться на 10-20 минут на комнатной температуре. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на 20 минут.
Плазма собирает плазму используя ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или гепарин как противокоагулятор. Центрифугуйте образцы на 15 минут на 2000-3000 РПМ на 2 - 8°К не позднее 30 минут собрания.
Моча собирает стерильной трубкой. Центрифуга на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Собирая плеуроперитонеал жидкую и спинномозговую жидкость, пожалуйста следовать процедурами вышеупомянутыми.
Супернатант культуры клетки собирает стерильными трубками рассматривая сделайте компоненты секретным. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут. Соберите супернатанц осторожно. Рассматривая компоненты внутри клетка, используйте ПБС (пэ-аш 7.2-7.4) для того чтобы разбавить подвес клетки к концентрации клетки приблизительно 1 миллион/мл. Повредите клетки через повторенные циклы замораживани-таяния для того чтобы позволить вне внутренним компонентам. Центрифугуйте на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Ткани Ринсе ткани в ПБС (пэ-аш 7,4) для того чтобы извлечь сверхнормальную кровь тщательно и весить перед гомогенизацией. Семените ткани и гомогенизируйте их в ПБС (пХ7.4) с стеклянным гомогенизатором на льде. Растайте на 2-8°К или замерзните на центрифуге -20°К. на 2000-3000 РПМ на приблизительно 20 минут.
Заметьте
Концентрация образца должна быть предсказана перед быть использованным в ассай. Если концентрация образца нет внутри ряд стандартной кривой, то потребители должны связаться мы для того чтобы определить оптимальный образец для их определенных экспериментов.
Образцы, который нужно использовать в течение 5 дней следует сохранить на образцах 2-8°К. должны быть аликвотед или должны храниться на -20°К не позднее 1 месяц или -80°К не позднее 6 месяцев. Авоид повторило циклы таяния замораживания.
Образцы должны быть принесены к комнатной температуре перед началом ассай.
Центрифуга для того чтобы собрать образец перед использованием.
Образцы содержа НаН3 нельзя испытать по мере того как оно блокирует работу пероксидазы (HRP) редиски лошади.
Соберите супернатанц осторожно. Когда седименты произошли во время хранения, центрифугирование должно быть выполнено снова.
* образец нельзя разбавить с этим набором. Вследствие материала мы используем для подготовки набора, взаимодействие матрицы образца может ложно отжать характерность и точность ассай.
Подготовка реагента
Все реагенты должны быть принесены к комнатной температуре перед использованием.
Стандарт воспроизводит 120μл стандарта (12.8нг/мл) с 120μл стандартного разжижителя для генерации запасного раствора стандарта 6.4нг/мл. Позвольте стандарту сидеть на 15 минут с нежным взволнованием до делать разбавления. Подготовьте двойные стандартные пункты серийно разбавлять 1:2 стандартного запасного раствора (6.4нг/мл) с стандартным разжижителем для произведения решений 3.2нг/мл, 1.6нг/мл, 0.8нг/мл и 0.4нг/мл. Стандартный разжижитель служит как зеро стандарт (0 нг/мл). Любое остальное решение должно замерзнуться на -20°К и использоваться не позднее один месяц. Разбавление стандартных предложенных решений следующим образом:
| 6.4нг/мл | Стандартное Но.5 | первоначальный разжижитель стандарта 120μл + стандарта 120μл |
| 3.2нг/мл | Стандартное Но.4 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.5 + 120μл |
| 1.6нг/мл | Стандартное Но.3 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.4 + 120μл |
| 0.8нг/мл | Стандартное Но.2 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.3 + 120μл |
| 0.4нг/мл | Стандартное Но.1 | 120μл стандартное разжижитель стандарта Но.2 + 120μл |
| Стандартная концентрация | Стандартное Но.5 | Стандартное Но.4 | Стандартное Но.3 | Стандартное Но.2 | Стандартное Но.1 |
| 12.8нг/мл | 6.4нг/мл | 3.2нг/мл | 1.6нг/мл | 0.8нг/мл | 0.4нг/мл |
Мытье 20мл разбавленное буфером концентрата 30кс буфера мытья в деионизированный или дистиллированная вода для того чтобы произвести 500 мл буфера мытья 1кс. Если кристаллы формировали в концентрате, то смешивание нежно до тех пор пока кристаллы совершенно не растворят.
Сводка
Помойте плиту 5 раз.
Добавьте решение а и Б. Инкубировать субстрата на 10 минут на 37°К.
Добавьте остановите решение и цвет превращается.
Прочитайте значение ОД не позднее 10 минут.
Ссылки
Б. Ривас-Сантьяго, Сада Э., Цуцуми в., Д. Агуйлар-Леона, Контрерас ДЖ.Л., Р. хэрнандез-Пандо.
Дж. Заражать. Дис. 194:697- 701(2006)