CO. Шанхая Korain Biotech, Ltd
Shanghai Korain Biotech Co Ltd
Add to Cart
96 колодцев подгоняют набор протеина ЭЛИСА к дМоузе реактивный
Кат.Но е0218Мо
Стандартный ряд кривой: 0.05мг/Л - 10мг/Л
Чувствительность: 0.021мг/Л
Размер: 96 колодцев
Хранение: Храните реагенты на 2-8°К. для хранения сверх 6 месяцев сошлитесь на срок годности держите его на циклах таяния -20°К. Авоид повторенных. Если индивидуальные реагенты раскрыты, то порекомендовано, чтобы набор был использован не позднее 1 месяц.
* этот продукт для пользы исследования только, не для пользы в процедурах по диагноза. Он сильно рекомендует прочитать эту инструкцию полностью перед использованием.
Принцип Ассай
Этот набор Энзим-соединенный Ассай иммуносорбента (ЭЛИСА). Плита былапокрыта с антителом мыши КРП. КРП представляют в образце добавлены и связывают к антителам покрытым на колодцах. И после этого биотинылатед антитело мыши КРП добавлено и связывает к КРП в образце. После этого Стрептавидин-ХРП добавлено и связывает к антителу Биотинылатед КРП. После инкубации унбоунд Стрептавидин-ХРП помыто прочь во время моя шага. Решение субстрата после этого добавлено и цвет превращается в пропорции к количеству мыши КРП. Реакция прекращена добавлением кислотного останавливает решение и абсорбансе измерен на 450 нм.
Обеспеченный реагент
| Компоненты | Количество |
| Стандартное решение (12.8мг/Л) | 0.5мл кс1 |
| Пре-покрытая плита ЭЛИСА | 12 * 8 хороших прокладки кс1 |
| Стандартный разжижитель | 3мл кс1 |
| Стрептавидин-ХРП | 6мл кс1 |
| Остановите решение | 6мл кс1 |
| Решение а субстрата | 6мл кс1 |
| Решение б субстрата | 6мл кс1 |
| Концентрат буфера мытья (30кс) | 20мл кс1 |
| Антитело мыши КРП Биотинылатед | 1мл кс1 |
| Инструкция потребителя | 1 |
| Уплотнитель плиты | пикс 2 |
| Сумка молнии | 1 пик |
Процедура по Ассай
1. Подготовьте все реагенты, стандартные решения и образцы как проинструктировано. Принесите все реагенты к комнатной температуре перед использованием. Ассай выполнен на комнатной температуре.
2. Определите число прокладок требуемых для ассай. Введите прокладки в рамки для пользы. Неиспользованные прокладки следует сохранить на 2-8°К.
3. Добавьте стандарт 50μл к стандарту хорошо. Примечание: Не добавьте антитело к стандарту хорошо потому что стандартное решение содержит биотинылатед антитело.
4. Добавьте образец 40μл к колодцам образца и после этого добавьте анти--КРП антитело 10μл к колодцам образца, тогда добавьте стрептавидин-ХРП 50μл к колодцам образца и стандартным колодцам (колодцу пустого контроля). Смешайте хорошо. Покройте плиту с уплотнителем. Инкубируйте 60 минут на 37°К.
5. Извлеките уплотнитель и помойте плиту 5 раз с буфером мытья. Выдержите колодцы с по крайней мере буфером мытья 0,35 мл на 30 секунд к 1 минута для каждого Вашингтона. Для автоматизированной стирки, аспирируйте все колодцы и помойте 5 раз с буфером мытья, переполняя подмимает с буфером мытья. Закрывайте плиту на бумажные полотенца или другой абсорбент материал.
6. Добавьте решение а субстрата 50μл к каждому колодец и после этого добавьте решение б субстрата 50μл к каждому хорошо. Инкубируйте плиту покрытую с новым уплотнителем на 10 минут на 37°К в темноте.
7. Добавьте 50μл остановите решение к каждому хорошо, голубой цвет изменит в желтый цвет немедленно.
8. Определите оптически плотность (значение ОД) каждого колодец немедленно используя набор читателя микроплате до 450 нм внутри 10 менуэтов после добавления решения стопа.
Ссылки
Хуттлин Э.Л., Джедрычовски М.П., Илья ДЖ.Э., Госвами Т., Р. Рад, Беаузолайл С.А., Дж. Виллен, В. Хаас, Сова М.Э., Гыги С.П.
Клетка 143:1174- 1189(2010)