Тест инкрети тиреоида ТЕСТА Thyrotropin TSH ELISA стимулируя

Горячий НАБОР ТЕСТА продажи TSH ELISA
REF: Тесты DS177701 96

Предполагаемое использование
Immunoassay для in vitro количественного определения thyrotropin в человеческой сыворотке.

1. Сводка

• Тиреоид-возбуждающая инкреть (TSH, thyrotropin) гликопротеид имея молекулярный вес приблизительно 30000 daltons и состоя из 2 субблоков.
• Измерение сыворотки концентрации thyrotropin часто (TSH), гликопротеида с молекулярным весом 28 000 daltons и сделанным секретным от anterior pituitary, вообще сосчитано как самый чувствительный индикатор доступный для диагноза первичного и вторичного (pituitary) гипотиреоза (1,2).
• Измерения TSH поровну полезны в дифференцировать вторичный и третичный (гипоталамический) гипотиреоз от основного заболевания тиреоида. Отпуск TSH от pituitary отрегулирован фактором thyrotropin выпуская (TRH), который сделано секретным подбугорьем, и прямым действием T4 и triiodothyronine (T3), инкретей тиреоида, на pituitary.
• Уровни роста T3 и T4 уменьшают ответ pituitary к stimulatory влияниям TRH. Во вторичном и третичном гипотиреозе, концентрация T4 обычно низка и уровни TSH вообще низки или нормальны. Или pituitary дефицит TSH (вторичный гипотиреоз) или недостаточность стимулирования pituitary TRH (третичным гипотиреозом) причиняют это.
• Тест стимулированием TRH дифференцирует эти условия. Во вторичном гипотиреозе, притуплен ответ TSH к TRH пока нормальный или замедленная реакция получены в третичном гипотиреозе. Более потом, пришествие immunoenzymometric assays обеспечивало лабораторию с достаточной чувствительностью для того чтобы включить дифференцировать гипертиреоза от euthyroid населения и расширять пользу измерений TSH. Этот метод второго поколения assay, который обеспечивают середины для дискриминации в hyperthyroid-euthyroid ряде. (3)

2. Материалы реагентов обеспечили
• Покрытое Microplate, 8 x 12 прокладок, 96 колодцев, пре-покрытых с анти--TSH мыши моноклональное.
• Калибраторы, 6 пробирок, 1 ml каждое, готовых для использования; Концентрация: 0 (a), 0,5 (b), 2 (c), 5 (d), 10 (e) и 25 (f) μIU/mL.
• Конъюгат энзима, 1 пробирка, 6,0 ml HRP (пероксидазы хрена) обозначил мышь моноклональное анти--TSH в буфере Tris-NaCl содержа BSA (альбумин глупой сыворотки). Содержит 0,1% предохранителя ProClin300.
• Субстрат, 1 пробирка, 11ml, готовое для использования, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Остановите решение, 1 пробирку, 6,0 ml 1 mol/l масляной серной кислоты.
• Концентрат моющего раствора, 1 пробирка, 25 ml (40X сконцентрировало), моющий раствор PBS-твена.
• IFU, 1 экземпляр.
• Крышка плиты: 1 часть.

Необходимы материалы (но не обеспеченный)
• Читатель Microplate с возможностью вещество-поглотителя длины волны 450nm и 620nm.
• Шайба Microplate.
• Инкубатор.
• Шейкер плиты.
• Микропипетки и multichannel микропипетки поставляя 50μl с точностью лучше чем 1,5%.
• Бумага вещество-поглотителя.
• Дистиллированная вода

3. Методика проверки

Обеспечьте что образцы, калибраторы, и управления пациентов на температуре окружающей среды (℃ 18-25) перед измерением. Смешайте все реагенты через нежно переворачивать до пользы.

• Используйте только число требуемых колодцев и форматируйте колодцы microplates для каждых калибратора и образца, который нужно assayed. • Добавьте µL 25 калибраторов или образцов к каждому колодцу.

• Добавьте µL 100 конъюгата энзима к каждому колодцу.

• Трясите microplate нежно на 30 секунд для того чтобы смешать.

• Покройте плиту с крышкой плиты и инкубируйте на 37℃ на 60 минут.

• Сбросьте содержание микро- плиты декантированием или устремленностью. Если сцеживающ, выстучайте и закрывайте сухой плиты с бумагой вещество-поглотителя.

• Добавьте µL 350 моющего раствора, сцедите (кран и помарка) или аспирируйте. Повторите 4 дополнительных времени для итога 5 мыть. Автоматизированную шайбу прокладки microplate можно использовать. В конце стирки, переверните плиту и выстучайте вне любой остаточный моющий раствор на бумагу вещество-поглотителя.

• Добавьте µL 100 субстрата к каждому колодцу.

• Покройте и инкубируйте на температуре окружающей среды (18-25℃) в темноте для реакции на 20 минут. Не трясите плиту после добавления подсостояния.

• Добавьте µL 50 решения стопа к каждому колодцу.

• Трясите на 15-20 секунд для того чтобы смешать жидкость внутри колодцы. Важно обеспечить что голубые изменения цвета, который нужно пожелтеть совершенно.

• Прочитайте absorbance каждого колодца на 450 nm (используя 620 до 630 nm как длина волны ссылки для того чтобы уменьшить хорошие несовершенства) в микро- читателе плиты. Результаты должны быть прочитаны не позднее 30 минут добавления останавливают решение