Этот тест-набор основан на конкурентном иммуноферментном анализе для обнаружения MQCA в образце.Связывающие антигены предварительно наносятся на полоски микролунок.MQCA в образце и связывающие антигены, предварительно нанесенные на микролуночные полоски, конкурируют за антитело против MQCA.После добавления ферментного конъюгата для окрашивания добавляют субстрат ТМБ.Значение оптической плотности (ОП) образца имеет отрицательную корреляцию с МККА в нем.Это значение сравнивается со стандартной кривой, после чего определяется концентрация MQCA.

2. Технические характеристики

Чувствительность: 0,5 частей на миллиард
Температура инкубатора: 25 ℃
Время инкубации: 30 мин ~ 15 мин

Предел обнаружения:
Ткань 1 мкг/л

Скорость перекрестной реакции:
МККА 100%
Олакиндокс <0,1%
Скорость восстановления:
Ткань 85%±10%

3. Компоненты

1	Полоски для микролунок	12 стрипов по 8 съемных лунок в каждом
2	6-кратный стандартный раствор (по 1 мл каждого)	0 частей на миллиард	0,5 частей на миллиард
		1,5 частей на миллиард	4,5 частей на миллиард
		13,5 частей на миллиард	40,5 частей на миллиард
3	Концентрированный ферментный конъюгат	1 мл	красный колпачок
4	Рабочий раствор антител	8 мл	синяя кепка
5	Субстрат А	7 мл	белая кепка
6	СубстратB	7 мл	черная кепка
7	Остановить решение	7 мл	желтая кепка
8	Раствор для повторного растворения	50 мл	прозрачная крышка
9	20-кратный концентрированный промывочный буфер	40 мл	белая кепка

4. Необходимые, но не предоставленные материалы

1) Оборудование: микропланшет-ридер (450 нм / 630 нм), гомогенизатор, осциллятор, центрифуга, мерные пипетки, устройство для сушки азотом и весы (чувствительность, обратная 0,01 г), инкубатор.
2) микропипетки: одноканальные от 20 до 200 мкл и от 100 до 1000 мкл и многоканальные 30～300 мкл;
3) Реагенты: этилацетат, н-гексан, HCl, NaCl, CH3CN.

5. Предварительная обработка образцов

инструкции
Перед предварительной обработкой любого вида проб необходимо решить следующие вопросы:
1) Для экспериментов можно использовать только одноразовые наконечники, и наконечники необходимо менять при использовании для абсорбции различных реагентов;
2) Перед экспериментом каждую экспериментальную посуду необходимо проверить на чистоту и при необходимости повторно очистить, чтобы избежать загрязнения, мешающего результатам эксперимента.

Базовые приготовления
1) Экстракт образца (хранить при 2~8℃ в течение 1 месяца): Возьмите 8,6 мл концентрированной HCl, добавьте деионизированную воду до 500 мл, затем добавьте 10 г NaCl, чтобы получить экстракт образца.

5.1 Ткани скота и птицы (курица, утка, свинина):
1. Отберите 2 ± 0,05 г гомогенизированного образца в центрифужную пробирку на 50 мл;
2. Добавьте 4 мл экстракта образца, тщательно встряхните в течение 1 мин;
3. Добавьте 4 мл этилацетата и 2 мл CH3CN, тщательно встряхните в течение 10 с;Центрифугировать при 4000 об/мин при комнатной температуре (20–25 ℃) в течение 10 мин (Примечание: на этом этапе необходимо встряхивать только в течение 10 с, слишком долгое встряхивание приведет к эмульгированию; , затем снова отцентрифугировать, чтобы получить достаточное количество надосадочной жидкости);
4. Перенесите 3 мл органической фазы верхнего слоя в прозрачный контейнер, высушите нижний слой азотом или воздухом при
водяная баня 56 ℃;
5. Добавьте 1 мл N-гексана, встряхивайте в течение 30 с, затем добавьте 0,5 мл раствора для повторного растворения, встряхивайте и тщательно перемешивайте в течение 30 с;центрифугировать при 4000 об/мин при комнатной температуре (20-25 ℃) в течение 5 мин.
6. Удалите органическую фазу верхнего слоя. Возьмите 50 мкл нижнего слоя для анализа.
Кратность разбавления образца: 0,5

6. Процедуры ИФА

6.1 Инструкции
1) Перед использованием доведите все реагенты и микропланшеты до комнатной температуры (20–25 ℃);
2) Верните все реагенты к температуре 2-8 ℃ сразу после использования;
3) Воспроизводимость анализа ELISA в значительной степени зависит от консистенции промывки планшета.Правильная промывка планшетов является ключевым моментом в процедурах ИФА;
4) Для инкубации при постоянной температуре все образцы и реагенты должны быть защищены от воздействия света, а каждый микропланшет должен быть закрыт защитной мембраной.

6.2 Порядок работы
1) Достаньте все необходимые реагенты и поместите при комнатной температуре (20-25 ℃) не менее чем на 30 мин.Обратите внимание, что перед использованием каждый реагент необходимо встряхнуть для равномерного перемешивания;
2) Возьмите необходимые микролуночные полоски и рамки планшета.Повторно запечатал неиспользованный микропланшет, хранящийся при 2-8 ℃;
3) Приготовление раствора: разбавьте 40 мл 20-кратного концентрированного промывочного буфера деионизированной водой в соотношении 1:19 (1 часть 20-кратного концентрированного промывочного буфера + 19 частей деионизированной воды) или приготовьте необходимое количество;
4) Нумерация: пронумеруйте микролунки в соответствии с образцами и стандартным раствором;каждый образец и стандартный раствор должны быть выполнены в двух повторностях;зафиксировать их положение;
5) Приготовьте смешанный раствор рабочего раствора антитела и конъюгата концентрированного фермента: Смешайте рабочий раствор антитела и конъюгат концентрированного фермента в соотношении 10:1 равномерно (1000 мкл рабочего раствора антитела + 100 мкл конъюгата концентрированного фермента, этот смешанный раствор следует использовать после приготовления, он не может храниться, количество упаковки имеет дополнительную сумму, подготовьте в соответствии с пропорцией.)
6) Добавьте 20 мкл образца или стандартного раствора в отдельные дублированные лунки, затем добавьте в каждую лунку по 70 мкл смешанного раствора рабочего раствора антител и конъюгата концентрированного фермента.Аккуратно перемешайте, встряхивая, закройте микропланшет покровной мембраной и инкубируйте при 25℃ в темноте в течение 30 мин;
7) Промыть микропланшет промывочным буфером по 250 мкл/лунку четыре-пять раз;пропитать лунку промывочным буфером на 15-30 сек, высушить абсорбирующей бумагой (если после взбивания остались пузырьки, срезать их чистым кончиком);
8) Окрашивание: в каждую лунку добавить по 50 мкл раствора субстрата А и по 50 мкл раствора Б.Аккуратно перемешайте, встряхивая, и инкубируйте при 25 ℃ в течение 15 мин в темноте для окрашивания;
9) Определение: добавить в каждую лунку по 50 мкл стоп-раствора.Смешайте, осторожно встряхивая.Установите длину волны устройства для чтения микропланшетов на уровне 450 нм, чтобы определить значение OD.(рекомендуется считывать значение ОП на двух длинах волн 450/630 нм в течение 5 мин).

7. Результат оценки

Есть два метода оценки результатов;первое - это грубое суждение, а второе - количественное определение.Обратите внимание, что значение OD образца имеет отрицательную корреляцию с содержанием MQCA.

7.1 Качественное определение
Диапазон концентраций (нг/мл) можно получить путем сравнения среднего значения оптической плотности образца со значением ОП стандартного раствора.Предполагая, что значение оптической плотности образца Ⅰ равно 0,3, а образца Ⅱ равно 1,0, в то время как значения стандартных растворов следующие: 2,043 для 0 частей на миллиард, 1,716 для 0,5 частей на миллиард, 1,215 для 1,5 частей на миллиард, 0,74 для 4,5 частей на миллиард, 0,313 для 13,5 частей на миллиард и 0,155 для 40,5 частей на миллиард, соответственно диапазон концентраций образца Ⅰ составляет от 13,5 до 40,5 частей на миллиард, а образец Ⅱ составляет от 1,5 до 4,5 частей на миллиард.

7.2 Количественное определение
Средние значения значений абсорбции эквивалентны проценту среднего значения ОП (В) образца и стандартного раствора, деленному на значение ОП (В0) первого стандартного раствора (0 стандарт) и впоследствии умноженному на 100%. , то есть,

Процент значения поглощения =	Б	×100%
	B0

B — среднее (двойные лунки) значение ОП образца или стандартного раствора.
B0 — среднее значение ОП стандартного раствора с концентрацией 0 нг/мл.
Нарисуйте стандартную кривую с процентами абсорбции стандартных растворов и полулогарифмическими значениями стандартных растворов MQCA (нг/мл) по осям Y и X соответственно.Считайте соответствующую концентрацию образца со стандартной кривой, включив процент его абсорбции в стандартную кривую.Полученное значение впоследствии умножается на соответствующую кратность разбавления, таким образом, окончательно получая концентрацию MQCA в образце.
Использование профессионального программного обеспечения для анализа этого комплекта будет более удобным для точного и быстрого анализа большого количества образцов.(Пожалуйста, свяжитесь с нами для этого программного обеспечения)

8. Меры предосторожности

1. Комнатная температура ниже 25 ℃ или температура реагентов и образцов, которые не возвращаются к комнатной температуре (20-25 ℃), приведет к более низкому стандартному значению ОП.
2. Сухость микропланшета в процессе промывки будет сопровождаться ситуациями, включающими нелинейность стандартных кривых и нежелательную воспроизводимость.
3. Равномерно перемешайте каждый реагент и реакционную смесь и тщательно промойте микропланшет, иначе будет нежелательная воспроизводимость.
4. Стоп-раствор – 2 М раствор серной кислоты, избегайте контакта с кожей;
5. Поместите неиспользованный микропланшет в самозапечатывающийся пакет, чтобы повторно запечатать его.Стандартное вещество и бесцветный формирователь цвета чувствительны к свету, поэтому они не могут подвергаться прямому воздействию света.
6. Не используйте набор по истечении срока годности.Использование разбавленных или фальсифицированных реагентов из наборов приведет к изменению чувствительности и значений оптической плотности обнаружения.Не обменивайте реагенты из наборов с разными номерами партий для использования.
7. Утилизируйте красящий раствор, имеющий любой цвет, указывающий на вырождение этого раствора.Значение обнаружения стандартного раствора 0 менее 0,5 свидетельствует о его вырождении.
8. Оптимальная температура реакции составляет 25 ℃, а слишком высокие или слишком низкие температуры приведут к изменениям в чувствительности обнаружения и значениях оптической плотности.

9. Хранение и срок годности

Хранение: хранить при температуре 2-8 ℃, не замораживать.
Срок годности: 12 месяцев;дата производства указана на коробке.
Примечание. Если в вакуумной упаковке микропланшета имеется утечка, его можно использовать, это не влияет на результат теста, его использование не должно вызывать беспокойства.

Q1: Когда он будет отправлен?
A1: Мы отправим вам товар как можно скорее в течение 7 рабочих дней после получения оплаты.(В случае внешних факторов, таких как эпидемия, доставка может быть отложена)

Q2: Поддерживает ли он OEM/ODM?
A2: Он может поддерживаться, но конкретное количество должно быть более 100 000 штук, что удобно для индивидуальных продуктов.

Q3: Как ваша фабрика делает с точки зрения контроля качества?
A3: У нас есть национальные сертификаты ISO9001 и ISO13485.Наш производственный процесс соответствует стандартным процедурам для обеспечения оптимального качества продукции.

Q4: Как обеспечить послепродажное обслуживание?
A4: Мы предоставляем профессиональное онлайн-техническое послепродажное обслуживание.Мы можем предоставить вам индивидуальное руководство по видео, телефону и т. д.

В5: какой способ оплаты?
A5: мы получаем оплату через T/T.

Q6: Как отправить?
A6: Выберите лучший для вас способ доставки, получив предложения от наших многочисленных совместных перевозчиков, а также отправьте товар в соответствии с вашими требованиями.

Запрос Корзина 0